慢性牙周炎患者经基础治疗后唾液上清中 miRNA.146a 表达降低。牙周基础治疗前后唾液上清 miRNA.146a 变化值与治疗前后菌斑指数、牙龈指数、牙周探诊深度和附着丧失的变化值呈正相关性，与治疗前后唾液中 TNF.fl、IL.1B、IL.6、IL.8 变化值呈正相关性，与 IL 一 10 变化值呈负相关性 1。

那么 miRNA 在牙周炎的发病过程中起什么作用？又该如何从 miRNA 角度突破牙周炎治疗瓶颈？

01  什么是微小 RNA（microRNA）?

    miRNA 是一类内源性、序列高度保守、大小约 22 个核苷酸的单链非编码小 RNA。miRNA 在转录后水平对基因的表达进行负调控，其原理是通过与基因  mRNA 3’ 非转录区(3’ UTR) 互补配对，导致 mRNA 的降解或翻译抑制。现己明确 miRNA 在免疫系统中起着调节作用，其中 miRNA-146a 是第一个被发现的与免疫炎症密切相关的 miRNA，在单核细胞、T 淋巴细胞和巨噬细胞等多种免疫和炎症细胞中高度表达 。

02  miRNA 与牙周免疫的关系

    牙龈卟啉单胞菌是证据充分的重要牙周致病菌，miRNA 可能在宿主一病原体反应中发挥作用。Jiang 等学者研究表明，miR 一 146a 在牙龈卟啉单胞菌 LPS 刺激人牙周膜细胞后通过下调促炎细胞因子的分泌和阻断牙周膜细胞中的 TLRs 信号通路发挥负调节作用。Xie 等学者引用牙龈卟啉单胞菌 LPS 处理人牙龈成纤维细胞的实验中也发现，miRNA 一 146a 和 miRNA 一 146b 一 5p 的下调可以促进炎症因子 IL 一 1B、IL 一 6 和 TNF 一仪的分泌增加，提示 miRNA 一 146 是牙周炎中的负调控因子。这些结果表明，miRNA 在牙龈卟啉单胞菌感染的炎症反应中起重要作用 2。

03   miRNA 在人牙周膜细胞 (PDLC) 和人牙周膜干细胞 (PDLSC) 成骨分化中的作用

人牙周膜细胞(PDLC)

   人牙周膜细胞 (PDLC) 是牙周膜中最常见的细胞，不断形成新的主纤维、牙骨质，并改建牙槽骨，对牙周组织的修复十分重要，是牙周治疗后形成牙龈与牙根面新附着的主要细胞来源，其成骨能力与牙周修复功能息息相关。miRNA 在 PDLC 矿化诱导和机械力诱导的成骨作用中均发挥了重要作用。

成骨分化

    Hung 等学者探讨了 miR-146a 在人 PDLC 成骨分化过程中的调控机制，研究证实 PDLC 在抗坏血酸的诱导下，碱性磷酸酶、骨桥蛋白和骨钙蛋白表达水平显著增高，并通过下调核因子 NF-κB 信号通路促进 PDLC 向成骨细胞分化。

机械应力

    机械应力作为外源性刺激，影响着牙周组织改建中骨吸收和骨形成之间的动态平衡。应力包括牵张力、流体剪切力和压应力。Qi 等学者利用流体剪切应力作用于 PDLC，miRNA 芯片检测结果发现，与对照组相比，miR-132 在流体剪切应力刺激下的表达显著升高，进一步探索发现 miR-132 可能作用于雷帕霉素靶蛋白通路调控流体剪切力诱导 PDLC 成骨分化。

人牙周膜干细胞 (PDLSC)

    人牙周膜干细胞（PDLSC）是牙周再生重要的种子细胞，其成骨潜能在牙周组织的自我更新以及牙周病变组织的修复与再生过程中发挥了重要的调控作用。目前研究发现，miRNA 也参与了 PDLSC 的成骨向分化调控。

成骨分化

    Liu 等学者在前期研究的基础上，采用荧光素酶报告基因检测结果证明，Wnt 通路中编码关键的转录因子 3(TCF3) 的基因也是 miR-17 的直接靶基因。TCF3 促进 PDLSC 的成骨向分化，且 miR-17 通过影响 TCF3 的表达发挥调控 PDLSC 成骨向分化的作用。相比复杂的通路级联激活的程序，miR-17 能够快速且简便地通过 TCF3 即可激活 Wnt 通路，从而发挥调控作用。

机械应力

    与 PDLC 类似，miRNA 也可能在 PDLSC 应力成骨细胞分化过程中发挥了作用。Wei 等学者发现，在使用基因芯片分析后发现，有 53 个 miRNA 表达出现显著差异，其中 26 个表达上调，27 个表达下调。筛选 10 个与机械力相关的关键 miRNA，利用荧光素酶报告发现，miR-21 直接作用于激活素受体 2B(ACVR2B) 基因的 3’-非编码重复序列，从而抑制 ACVR2B 的表达，且 ACVR2B 功能的获得和丧失均会影响 PDLSC 成骨分化 。

下图为参与人牙周膜来源细胞成骨分化的 miRNA 一览

04    从微小RNA角度治疗牙周疾病的

研究思路

    miRNAs 是影响基因表达的重要调控因子，参与宿主免疫应答和炎症反应。其既可诱导干细胞成骨分化，促进牙槽骨再生，亦可抑制间充质干细胞的骨向分化，阻碍牙槽骨的形成；此外，还可通过调控炎症通路间接影响牙周炎症的进行 。通过分别使用 miRNA 模拟物或 miRNA 拮抗剂可以增强或限制 miRNA 水平。miRNA 模拟物是化学合成的短双链寡核苷酸，其在功能上模拟 premiRNA 复合物。相反，miRNA 拮抗剂是单链寡核苷酸，其补充 miRNA 序列并且被设计用于功能性地降低 miRNA 活性。未来的研究旨在确定 miRNA 的独特组合和剂量，结合合适的载体来用于对抗和逆转牙周病 。

原创： 史克牙 e 汇